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淋巴细胞分离液操作步骤说明

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淋巴细胞分离液操作步骤说明

作者:admin 来源:原创 发布日期:2019-04-14 20:38 点击次数:

淋巴细胞分离液操作步骤是哪些?今天由华精生物科技的小编给大家介绍下。淋巴细胞分离液主要用于分离人外周血淋巴细胞的分离,也适用于大多数哺乳动物单个核细胞的分离。具有低毒、高得率、高纯度等特点。
淋巴细胞分离液
使用操作步骤:

(1)取新鲜抗凝全血或者去纤维蛋白血液,用等体积的全血及组织稀释液或者PBS稀释全血。
(2)在离心管中加入适量分离液,将稀释后的血液平铺到分离液液面上方,注意保持两液面界面清晰。
(3)室温,水平转子500~1000g,离心20~30min。
(4)离心后将出现明显的分层:最上层是稀释的血浆层,中间是透明的分离液层,血浆与分离液之间的白膜层即为淋巴细胞层,离心管底部是红细胞与粒细胞。
(5)小心的吸取白膜层细胞到15mL洁净的离心管中, 10mL PBS或细胞洗涤液洗涤白膜层细胞。250g,离心10min。
(6)弃上清,5mL的PBS或细胞清洗液重悬细胞,250g,离心10min。
(7)重复步骤6;
(8)弃上清,细胞重悬备用。
淋巴细胞分离原理图

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